不同环纹血藤析和药材一质量评价的分树脂数鸡

目的不同 考察鸡血藤断面树脂环纹数与其药材品质之间的相关性。方法 醇溶性浸出物含量按照《中国药典：一部》（2015年版）附录XA法测定；采用高效液相色谱法测定原儿茶酸、树脂数鸡儿茶素、环纹表儿茶素、血藤析和芒柄花素及染料木素的药材含量及建立高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，用SPSS对其环纹数与醇溶性浸出物及5个化学成分进行相关性分析。质量结果 醇溶性浸出物的不同含量在3环左右时达到一个峰值，后随着环纹数的树脂数鸡增加，变化趋势有所不同。环纹不同树脂环纹数药材中原儿茶酸、血藤析和儿茶素及表儿茶素的药材含量差异较大，而芒柄花素与染料木素的质量含量差异较小，其中儿茶素与表儿茶素、不同芒柄花素与染料木素在不同树脂环纹药材中的树脂数鸡动态变化趋势较为一致；除1环样品外，同一植株不同环纹数的环纹药材样品具有较高的相似度；环纹数与醇溶性浸出物及5个化学成分之间无显著相关性。结论 各指标性成分的含量与树脂环纹数之间没有一定相关性，鸡血藤横切面的树脂环纹数的多少不可以作为评判药材质量优劣的直观依据，但以3环以上入药为宜。

鸡血藤为主产于广东、广西、云南等地的岭南特色药材，《中国药典：一部》（2015年版）收载为豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn.的干燥藤茎，具有补血、活血、通络之功效，用于治疗月经不调、血虚萎黄、麻木瘫痪、风湿痹痛等症[1]，为鸡血藤片、金鸡胶囊、妇科千金片、花红片、正天丸等中成药的组方原料，临床应用广泛，药用需求量大。

鸡血藤为多年生木质藤茎类药材，野生种群主要分布于山地林间。随着经济林地的开发，其群落生态环境遭受严重破坏，野生种群遭到掠夺性砍伐，种群恢复与更新速度缓慢，加上鸡血藤使用量增加，国内野生资源已满足不了用药需求，商品药材多从越南、缅甸、柬埔寨等国进口。由于产地生态环境及植株生长年限的不同，藤茎的不同部位粗细不一，断面的树脂环纹数及色泽差异较大，药材质量参差不齐。现行《中国药典》收录的鸡血藤药材性状鉴定项下没有规定断面的树脂环纹数，要求醇溶性浸物含量不得少于8%，传统入药习惯以3环以上为宜。鸡血藤断面树脂环纹数能否作为评判药材内在品质的性状指标，尚待进一步研究。据化学成分及药理研究结果，学者们推测黄酮类成分可能是鸡血藤对血液系统作用及抗肿廇等活性部位[2,3,4]。鸡血藤总黄酮中的黄烷醇类成分，如儿茶素和表儿茶素含量较高；异黄酮类成分，如芒柄花素、染料木素等的含量较低[5,6,7,8]。因此本研究在醇溶性浸出物含量测定的基础上，以黄酮类组分为检测指标，开展不同树脂环纹数鸡血藤药材品质的分析与评价，以期为鸡血藤入药标准的性状评判提供科学依据。

1 仪器、试药与材料

1.1 仪器

Waters2695高效液相色谱仪；Empower色谱工作站（美国Waters公司）；Waters XTerra C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm);LC-20A型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；A560型紫外-可见光分光光度计（翱艺仪器有限公司）；XR 205SM-DR型十万分之一天平（瑞士Precisa公司）；BP-110S型万分之一天平（德国Sartorius公司）；KQ3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）。

1.2 试药

无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯等均为分析纯，水为蒸馏水，乙腈、磷酸、醋酸等为色谱纯。原儿茶酸（批号：110809-200604）、儿茶素（批号：201102）、表儿茶素（批号：110878-200102）、芒柄花素（批号：111703-200501）、染料木素（批号：111704-200501）、大豆苷元（批号：20120426）、毛蕊异黄酮（批号：100618），均供含量测定用，中国药品生物制品检定研究院；异甘草素（纯度≥98%，批号：140716），四川省维克奇生物科技有限公司。

1.3材料

选取梅州、从化、惠州3个不同居群的野生鸡血藤，截取同一植株、同一条藤茎的不同粗度部位（分别具有1～9个树脂环的藤茎），趁鲜切片干燥，粉碎，过40目筛，置密封袋中保存备用，见表1。本实验所用材料经广州中医药大学刘军民教授鉴定为豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn.的藤茎。

2 方法与结果

2.1 醇溶性浸出物含量

按照《中国药典：一部》（2015年版）附录XA法测定。

2.2 原儿茶酸、儿茶素及表儿茶素的含量测定

参照刘军民等[9]方法测定。

2.2.1 色谱条件

流动相A为0.1%磷酸，流动相B为乙腈，梯度洗脱（0～18 min,10%B;18～35 min,12%B;35～40 min,100%B;40～50 min,10%B）；流速：1.0 m L·min-1；柱温：25℃；检测波长：290 nm（原儿茶酸）、280 nm（儿茶素、表儿茶素）；进样量：20μL。对照品及供试品溶液色谱图见图1。

2.2.2 对照品溶液的制备

取原儿茶酸、儿茶素和表儿茶素对照品适量，精密称定，用50%甲醇配制成浓度分别为0.439、0.472、0.415 mg·m L-1的对照品贮备液。分别精密吸取100、200、200μL对照品贮备液至2 m L量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液，备用。

2.2.3 供试品溶液的制备

取鸡血藤粉末1.0 g，精密称定，加甲醇60 m L，静置30 min后超声50 min，滤过，水浴蒸干滤液，残渣用20 m L蒸馏水溶解，转置分液漏斗中；分别加乙酸乙酯20 m L，萃取3次，合并乙酸乙酯液，减压回收至干；用少许50%甲醇溶解，定容至10 m L量瓶，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，即得。

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